这篇文章给大家聊聊关于DNase污染如何消除,以及rna蛋白污染解决办法对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站哦。
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rna凝胶电泳一般用来做什么
检测RNA提取的质量、浓度、完整性。
凝胶电泳条带数量用来看完整性,条带是否清晰看是否降解,条带亮度用来测浓度,OD值260/280用来检测是否污染或者降解。
RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18srRNA、28srRNA、5srRNA的三条带,且28srRNA的亮度应为18srRNA的两倍。
rna纯度的指标
电泳法谱测RNA完整性
一般认为RNA中的蛋白或是其他有机物的污染是可以接受的,当R<1.8时,溶液中蛋白或是酚类物质残留。当R>2.2时,说明RNA已经水解为单核酸。一般的,如果你能做到1.9-2.0之间,说明RNA纯度已经很高了。但是如果你采用Tris作为缓冲液检测吸光度时,R值可能会>2(一般应<2.2的)。
DNase污染如何消除
方法:
1、使用DNA酶DNAseI消化1小时,恒温37度。
2、离心取上清的时候,一定要小心不要取到中间的膜和下面的液体。
3、直接加NaOH溶液与提取液混合搅拌,然后离心就可以了.因为RNA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,离心后的上清液就不含有DNA了。
掌握rna提取技术有什么应用价值
掌握RNA提取技术,才能进行下一步的实验工作。真核细胞总RNA分离提取的目的是要获得高纯度的具有充分长度的RNA分子,包括RNA的纯度和完整性。RNA分离的关键是尽量减少RNA酶的污染。RNA酶活性非常稳定,分布广泛,除细胞内源性的RNA酶外,环境中也存在RNA酶。因此在提取RNA时,应尽量创造一个无RNA酶的环境,包括去除外源性RNA酶的污染和抑制内源性RNA酶活性。
OK,关于DNase污染如何消除和rna蛋白污染解决办法的内容到此结束了,希望对大家有所帮助。